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1925年10月，蔣介石率國民革命軍第一軍等進行第二次東徵。當時，周恩來擔任第一軍政治部主任兼第一軍第一師黨代表和東徵軍總政治部主任，黃埔軍校教官和畢業學生，擔任第一軍各級指揮官和黨代表。經過激戰，東徵軍攻佔陳炯明老巢惠州，其他殘餘部隊也很快被肅清，廣東革命根據地得到鞏固。
蔣介石羽翼漸豐以後，開始露出他反動的真面目。1926年3月16日，蔣介石指使孫文主義學會分子歐陽格，以黃埔軍校駐省辦事處名義，傳令海軍局代理局長、中山艦艦長李之龍（共產黨員），調中山艦到黃埔候用。當中山艦開到黃埔後，蔣介石派系隨即散佈謠言，誣陷&ldo;中山艦擅入黃埔，是共產黨陰謀暴動&rdo;。3月20日，蔣介石宣佈全城戒嚴，命令解除中山艦武裝，逮捕李之龍，派軍隊收繳工人糾察隊武裝，包圍省港罷工委員會和蘇聯顧問住所，強迫在第一軍工作的周恩來等共產黨員退出該軍。中山艦事件（也稱&ldo;三&iddot;二o&rdo;事件）是蔣介石陰謀奪取國民黨和國民革命軍領導權的重要步驟。毛澤東、陳延年、周恩來主張以葉挺獨立團為主，發動工農群眾，聯合國民黨左派和其他各軍，聲討蔣介石，逼其下臺，但中共總書記陳獨秀採取讓步政策，結果，共產黨員全部退出第一軍。同時，蔣介石借中山艦事件排擠國民政府主席汪精衛，將事件諉過於汪精衛，說汪精衛挑撥國共關係，迫使汪精衛離開廣州出國。4月16日，召開國民黨中央黨部與國民政府聯席會議，改選國民黨中央政治委員會和軍事委員會，蔣介石出任軍事委員會主席，進一步掌握了國民黨軍政大權。
數天後，蔣介石又提出&ldo;整理黨務案&rdo;，共九條內容，規定共產黨人不能再擔任國民黨中央黨部的部長；限制共產黨員加入國民黨者，在國民黨高階黨部任執行委員時，其額權不得超過該黨部執行委員總權三分之一等。此案於5月15日獲得國民黨二屆二中全會透過。蔣介石藉此改組中央黨部。當上了組織部長和軍人部長。國民黨中央常委會委員長一職由張靜江代理，中央政治會議席由譚延闓代理，張、譚二人均受蔣介石操縱，至此，蔣介石把國民黨的黨權也抓到手。
三
1926年初，廣東革命根據地得到統一和鞏固，廣西李宗仁、湖南唐生智等也加入了革命陣營，武裝討伐北洋軍閥的條件基本具備。同時，北洋軍閥聯合進攻北方馮玉祥國民軍並準備南伐，國共兩黨及時決定出兵北伐。1926年5月，第七軍鍾祖培第八旅和第四軍葉挺獨立團分途由桂、粵入湘援助唐生智，揭開了北伐戰爭的序幕。
蔣介石是極力主張北伐的。其時，他已初握大權，希望透過北伐，進一步擴大自己的權勢。1926年5月31日，國共合作的北伐總司令部成立。6月4日和6日，國民黨中央執行委員會和國民政府先後任命蔣介石為國民革命軍總司令。7月9日，蔣介石舉行了總司令就職及國民革命軍北伐誓師典禮。國民革命軍總參謀長為李濟深，總政治部主任為鄧演達，前敵總指揮為唐生智，行營參謀長為白崇禧，兵站總監為俞飛鵬，軍事總顧問為加倫。
國民革命軍共轄八個軍，第一軍軍長何應欽，主要將領有王柏齡、蔣伯誠、顧祝同、張貞、馮軼裴、譚曙卿、葉劍英、王俊、劉峙、錢大均等；第二軍軍長譚延闓（副軍長魯滌平代），主要將領有魯滌平、嶽森、張輝瓚、譚道源、戴嶽、陳嘉佑等；第三軍軍長朱培德，主要將領有黃實、王均、朱世貴、李明揚等；第四軍軍長李濟深（副軍長陳可鈺代），主要將領有陳可鈺、陳銘樞、蔣光鼐、張發奎、朱暉日等；第五軍軍長李福林，主要將領有劉敏、練炳章、王若周等；第六軍軍長程潛，主要將領有唐蟒、鄧彥華、楊源浚等；第七軍軍長李宗仁，主要將領有
